原代细胞是指从不同机体（人、大鼠、小鼠、兔子等等）中取出不同的组织进行机械破碎或者各种酶液进行消化，分成单个细胞后，在体外进行细胞的培养。原代细胞因为来源机体组织样本，所以保留了很多机体的生理功能，非常适合实验材料的应用研究。在生物研究广泛的应用于，分子生物学、细胞生物学、基因组学、蛋白质学等等。
细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一，分为原代培养和传代培养两大类。原代培养也叫初代培养，是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，适于做细胞形态、功能和分化等研究。 细胞培养要遵循严格的步骤，任何一步的忽视都有可能导致细胞培养失败。
培养方法与步骤，原代细胞培养具体步骤如下：
1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中浸润2-10分钟。
4、剪切：用眼科剪把组织切成2-3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多3-5倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5、消化：用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离：在消化过程中见消化液混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8、培养：培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、较高的相对饱和湿度(95%)。 原代细胞培养是成功传代之前的培养，是建立各种细胞系（株）必经的阶段。假如原代培养能够维持几小时甚至更长，即可进行进一步筛选。
