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发布日期:2024/8/12 10:28:00

观察啮齿类动物的焦虑状态通常依赖于物种特定的行为,如增加风险评估、减少探索、寻求庇护、逃跑、掩埋或排便。在啮齿类动物中最常用的行为测试之一是旷场实验(Open Field Test,OFT),或称敞箱实验,是常用的研究动物自发活动、探索行为和焦虑、抑郁状态的经典行为学实验。该行为范式应用历史悠久,是由Calvin Hall于1934年设计发明的,最初应用于研究大鼠的情绪变化(记录排便评分),后推广到小鼠及其他动物上。如今,由于可以使用自动跟踪软件分析中央区活动时间作为焦虑的评价指标,这使旷场实验成为最广泛使用的焦虑测试。该模型的设计原理是基于啮齿动物面对新异环境会产生好奇心而去主动探索,但另一方面,它们又存在因恐惧回避明亮开阔、未知、可能有潜在危险的场所的天性,其活动具有趋触性(thigmotaxis) ,即动物在探索开放空间时“贴墙”活动的趋向性。利用这种探索动机和恐惧回避的矛盾冲突心理,在造成动物焦虑情绪的同时, 不仅可以评估实验操作对焦虑样行为的特定影响,还可以研究非特异性影响,特别是对一般活动的影响。

 

仪器介绍

1. 仪器名称:大小鼠旷场实验行为分析系统。

2. 硬件系统:旷场实验箱、摄像机、实验专用电脑。

3. 软件系统:如TopScan Light®,VisuTrack等软件。包括实验设置,图像采集与分析,数据显示与导出等功能。

 

实验程序

目前各项研究中应用旷场实验的一般程序基本一致,但具体细节不尽相同。

 

基本程序如下:

1. 大/小鼠在购入后进行7天或以上的适应性喂养,实验人员可每天抚摩动物一定时间,使其适应环境和光暗周期以及熟悉研究人员。

2. 在实验的当天早上,称重并记录实验动物的体重。

3. 在测试前一小时提前将实验动物转运至测试室,以适应该房间,避免新环境引起动物的应激和压力。

4. 将摄像机调试好高度,确保在电脑屏幕上能看到箱体的所有区域。

5. 实验者调试好实验参数,在操作软件中记录实验日期、动物的分组及编号等信息。

6. 在测试前,通过喷洒75 %的酒精并用纸巾擦拭干净,确保实验箱清洁无味。

7. 实验时握住大/小鼠尾巴根部 1/3 处将其从饲养笼中取出,注意背向实验人员,避免暴力操作等造成动物应激的因素。

8. 将实验动物迅速轻柔地放置到实验箱的中央区域,同时启动视频采集与分析系统,自动记录实验动物在旷场中的活动情况。

9. 实验者立即站到1.5 m外观测,或离开行为测试室到另外一个可以观测到动物的房间。同样,这应该有助于减少对动物的压力,并尽量减少潜在的外部影响。

10. 通常设置实验时间为15 min。

11. 实验结束后停止并保存录像,将动物从实验箱中取出,然后放回饲养笼中。

12. 每次测试结束后,需要清除掉上一只动物的排泄物,并用75 %的酒精去除气味,待箱体干燥无味后再进行下一只动物的实验。

13. 导出数据进行统计分析。

 

资料来源参考:脑声常谈

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