实验背景：抑郁症（depression，Dep）是最常见的情感障碍，具有高发病率、高复发率和高致残率，其典型症状包括情绪低落、兴趣丧失、快感缺失、认知障碍、社交障碍、睡眠紊乱和躯体症状等，严重可致自杀。抑郁症病因及病理机制复杂，现有的任一假说都无法全面揭示抑郁症发病机制。目前抑郁症的动物模型可根据其建模手段分为应激模型、药理学模型、转基因模型和手术损伤模型。
(一)神经生化功能改变模型
方法一
1. 造模材料
动物：健康纯种小鼠，雄性，4～5周龄；药物：利舍平。
2. 造模方法
于小鼠尾静脉注射2mg/kg利舍平后观察10h。
3. 造模原理
利用利舍平的拮抗作用建立抑郁症动物模型。
4. 造模后一般变化
在注射利舍平后半小时出现眼睑下垂，1h后出现运动不能，不能超出直径5cm的范围，身体蜷缩，受到外界刺激反应迟缓。
5. 造模后生化变化
对照组小鼠脑内去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、5-HT含量分别为(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模组小鼠脑内 NE、5-HT含量分别为(176.03±2.70)ng/(ml·g)，(174.98±9.32)ng/(ml·g)，两组间存在显著性差异。
方法二
1. 造模材料
动物：健康纯种小鼠，雄性，4～5周龄；
药物：利舍平；器械：水槽。
2. 造模方法
于尾静脉注射半量利舍平(1mg/kg)，然后将小鼠四肢绑扎固定于木板，浸入20℃左右水槽中，水面深至剑突部位，持续浸泡10h后，将其取出观察。
3. 造模原理
利用环境刺激造成应激状态后加半量利舍平造成抑郁动物模型。
4. 造模后一般变化
造模初期出现急躁、焦虑、烦躁、愤怒的表现。随着造模时间的延续，小鼠表现为倦怠、受到外界刺激反应迟缓，活动范围缩小，逐渐至直径为5cm的范围内。
5. 造模后生化变化
对照组小鼠脑内NE、5-HT含量分别为(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模组小鼠脑内NE、5-HT含量分别为(179.89±2.70)ng/(ml·g)，(176.96±9.25)ng/(ml·g)，两组间存在显著性差异。
(二)脑卒中后抑郁状态动物模型
1. 造模材料
动物：雄性Wistar大鼠，体重250～300g；
药物：麻醉剂，生理盐水；器械：止血钳，振荡器。
2. 造模方法
在10％水合氯醛(400mg/kg)麻醉下，剪开大鼠头部皮肤，暴露颅骨，应用牙科钻分别在左侧颅骨钻6个孔，用眼科剪翻开左侧颅骨，暴露左侧脑硬脑膜，用虹膜剪轻轻剪开硬脑膜，露出软脑膜，使用蘸了生理盐水的棉签轻轻擦拭(在手术显微镜下)，至镜下见不到血管为止，缝合皮肤。
将动物予以夹尾1min、禁水24h、禁食24h、45℃环境5min、昼夜颠倒24h、水平振荡30min(160次/min)、4℃冰水游泳5min等方法刺激。这7种刺激每天随机采取一种，共安排3周。即包括：3次24h禁食，3次24h禁水，3次昼夜颠倒，3次4℃冰水游泳5min，3次45℃烘箱热烘5min，3次夹尾1min，3次30min高速水平振荡(160次/min)。
每种刺激的操作方法如下：
(1) 禁食：24h断料，即早7：00至次日早7：00不喂食。
(2) 禁水：24h断水，即早7：00至次日早7：00不喂水。
(3) 昼夜颠倒：于早7：00将动物放入昼夜颠倒箱中，不开灯使动物处于黑暗状态；至晚19：00将昼夜颠倒箱的日光灯打开，使动物处于光照状态，直至次日早7：00取出。
(4) 冰水游泳：将动物放入盛有4℃冰水的桶中(水深15cm)，大鼠的后足尖刚能触 及桶底，5min后将动物取出放回笼中。
(5) 热烘：烘箱温度调至45℃恒定，将动物放入烘箱中，5min后将动物取出。
(6) 夹尾：将大鼠放入固定笼中，露出尾部，用止血钳夹住距尾根1cm处(用力不要过大，使大鼠发出哀叫即可)持续1min后，将大鼠拉出放回笼中。
(7) 振荡：将大鼠放入振荡器中，高速(160次/min)水平振荡30min后取出。 将动物单笼饲养。
3. 造模原理 去除大鼠脑左侧皮层血管建立脑缺血模型，在此基础上加用孤养法和慢性不可预见的温和性应激方法，造成脑卒中后抑郁状态动物模型。
4. 造模后变化
麻醉清醒后即出现了病灶对侧肢体轻度功能障碍；术后1～2周出现易激惹；术后1周肢体功能有所恢复；术后3周，即慢性应激2周后出现活动减少，常蜷缩少动，快感缺乏，提示卒中后抑郁(post stroke depression, PSD)大鼠模型已建立。
5. 注意事项
手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作。饲养室内尽可能保持动物的最适温度、湿度。
扫码关注公众号